"HEK293-EBNA Thawing人胚腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HEK293-EBNA Thawing人胚腎細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：４-１：１０傳代；每周２次。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEK293-EBNA Thawing人胚腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
H1437細胞系相關產(chǎn)品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
KM.12細胞系相關產(chǎn)品：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
SUD4細胞系相關產(chǎn)品：HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞
P30-OHK細胞系相關產(chǎn)品：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
MCAEC細胞系相關產(chǎn)品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
HCC1359細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
HEL-92_1_7細胞系相關產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
H295R細胞系相關產(chǎn)品：Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
JHH-7細胞系相關產(chǎn)品：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
GM03320D細胞系相關產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
ARH-77細胞系相關產(chǎn)品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
HEC1A細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
hFOB細胞系相關產(chǎn)品：H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
HEp-2細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
RSC96細胞系相關產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、EAC細胞
NCI-HUT-69細胞系相關產(chǎn)品：SKUT1細胞、FBHE細胞、BE(2)M17細胞
H-1781細胞系相關產(chǎn)品：RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
C26細胞系相關產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
HKC細胞系相關產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
L cell line細胞系相關產(chǎn)品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
CMT 93細胞系相關產(chǎn)品：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
CMT 93細胞系相關產(chǎn)品：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
MHHCALL2細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
RIN14B細胞系相關產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
UACC 893細胞系相關產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
639V細胞系相關產(chǎn)品：Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
HEK293-EBNA Thawing人胚腎細胞系
NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
PK 15細胞系相關產(chǎn)品：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
A 2058細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
NCI-H1963細胞系相關產(chǎn)品：IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
293 H細胞系相關產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
NPA87-1細胞系相關產(chǎn)品：SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
BNL.CL2細胞系相關產(chǎn)品：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
JHH-7細胞系相關產(chǎn)品：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
KYSE-50細胞系相關產(chǎn)品：Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
TB1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞
L23/P細胞系相關產(chǎn)品：ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
LC-2-Ad細胞系相關產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
28SC細胞系相關產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
MM1S細胞系相關產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
MM1S細胞系相關產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
HLFa細胞系相關產(chǎn)品：H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
KM H-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
TE-8細胞系相關產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
NCI-SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
EFM19細胞系相關產(chǎn)品：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
OCI-Ly 18細胞系相關產(chǎn)品：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
KU-19-19細胞系相關產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
DHL-6細胞系相關產(chǎn)品：MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞
P30OHK細胞系相關產(chǎn)品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
OE-33細胞系相關產(chǎn)品：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
OVCA432_Bast細胞系相關產(chǎn)品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
U-2 OS細胞系相關產(chǎn)品：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
HA1800細胞系相關產(chǎn)品：HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
H-2452細胞系相關產(chǎn)品：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞
WiDr-TC細胞系相關產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
HEK293-EBNA Thawing人胚腎細胞系
BCECs細胞系相關產(chǎn)品：PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
KYSE0030細胞系相關產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
Y-1細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
RPMI-1788細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
UT7細胞系相關產(chǎn)品：MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
SK-MES1細胞系相關產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
OCI-Ly 7細胞系相關產(chǎn)品：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞
MAD109細胞系相關產(chǎn)品：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
MV(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
H-1299細胞系相關產(chǎn)品：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞
TERT-RPE1細胞系相關產(chǎn)品：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞
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