"SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型來(lái)選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過(guò)夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：５傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱(chēng)指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。３．剪開(kāi)紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時(shí)，處理方式為：在寄送過(guò)程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿(mǎn)培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象，若有任何問(wèn)題，不要打開(kāi)蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后，于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)盤(pán)，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
NCI-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
Hs 606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
WEHI164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞
WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
McA-RH 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H157細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
UM-UC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞
HPB/ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
SACC-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC6細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
U-373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-132細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞、GS9L細(xì)胞
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
CAL27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 231細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、TO175T細(xì)胞
NBL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-039細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
HBVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
HT 1376.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
BJA-B-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞
CMT 167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞
UO.31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細(xì)胞、GB-1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
PLC PRF 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RLE-6TN細(xì)胞、U-2932細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞
CCRF-CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞、Alexander細(xì)胞
HCC-1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256-TC細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞、MEF細(xì)胞
HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
A172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 8細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB361細(xì)胞、SW-837細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
HCC-202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞
RIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AKR細(xì)胞、H-2081細(xì)胞、H8細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞
EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞
CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞
RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS細(xì)胞、AD293細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞
Evsa T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539細(xì)胞、U138細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞
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