"SK-MEL-24 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SK-MEL-24 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-MEL-24 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：星形的
DU_145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
NCIH1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
UT7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
RA 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、BrCL12細胞、LS 180細胞
MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細胞、Farage細胞、BpRc1細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
NS-20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
HPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
SK-MEL-24 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
Hs934T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
NCI/ADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞
MRASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞
CHP 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞
MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
CORL23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
OV3121細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
8305C_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
SK-MEL-24 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
P3-X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
NCI-Hut 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞
U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞
Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
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