"NCI-H660 Thawing人小細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H660 Thawing人小細胞癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：２-３天換液１次。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H660 Thawing人小細胞癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
【懸浮型細胞的傳代操作】１)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心１０００rpm ５分鐘；２)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)?！咀⒁馐马棥浚?嚴格的無菌操作；２)適度消化：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。附：EDTA(０.０２％四乙酸二鈉)消化液配方：EDTA ０.２０g，NaCl ８.００g，KCl ０.２０g，KH２PO４ ０.０２g，葡萄糖 ２.００g，０.５％紅４ml，加入蒸餾水定容至１０００ml。１０磅２０min高壓滅菌，使用時調(diào)節(jié)PH值到７.４。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要徹底清洗，否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
M14細胞系相關產(chǎn)品：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞
MHCC 97-L細胞系相關產(chǎn)品：CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
D283-MED細胞系相關產(chǎn)品：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
8402細胞系相關產(chǎn)品：VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
RPMI7951細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
BC-021細胞系相關產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關產(chǎn)品：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
KYSE-150細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞
CORL51細胞系相關產(chǎn)品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
GRSL細胞系相關產(chǎn)品：Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞
TE-11細胞系相關產(chǎn)品：HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
SK-GT-2細胞系相關產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
Normal Rat Kidney細胞系相關產(chǎn)品：526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞
TGBC11T細胞系相關產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
H4-II-EC3細胞系相關產(chǎn)品：SUM-190細胞、Panc 10.05細胞、N2a細胞
B16 F10細胞系相關產(chǎn)品：A-704細胞、A549 ATCC細胞、Panc02細胞
NB.4細胞系相關產(chǎn)品：FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關產(chǎn)品：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
RWPE1細胞系相關產(chǎn)品：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
TALL1細胞系相關產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產(chǎn)品：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
H-295R細胞系相關產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
KRC-Y細胞系相關產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
Hs606細胞系相關產(chǎn)品：JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞
NCI-H660 Thawing人小細胞癌細胞系
HBVSMC細胞系相關產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
NCI-H220細胞系相關產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
RWPE1細胞系相關產(chǎn)品：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
GP2d細胞系相關產(chǎn)品：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
DMS153細胞系相關產(chǎn)品：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
SKLU01細胞系相關產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
GM15452細胞系相關產(chǎn)品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
Sf21細胞系相關產(chǎn)品：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞
WEHI3B細胞系相關產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
HCC-2279細胞系相關產(chǎn)品：HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
MOLM-13細胞系相關產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
NCCIT細胞系相關產(chǎn)品：L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
EFO 27細胞系相關產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
OC316細胞系相關產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
SEG-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
SK MEL-28細胞系相關產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
BALB/3T3細胞系相關產(chǎn)品：GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞
RPMI no 8226細胞系相關產(chǎn)品：NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
LS 180細胞系相關產(chǎn)品：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
HEK293-H細胞系相關產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
VM-CUB-1細胞系相關產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
SKCol1細胞系相關產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
SW 1222細胞系相關產(chǎn)品：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
SU-DH-L5細胞系相關產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
R3/1細胞系相關產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
Uhth-74細胞系相關產(chǎn)品：HOS (TE85, Clone F5)細胞、P30-OHK細胞、OSKM-1細胞
FRO細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞
AN3細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
NCIH847細胞系相關產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
NCI-H660 Thawing人小細胞癌細胞系
NCIH524細胞系相關產(chǎn)品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
HEP3B2細胞系相關產(chǎn)品：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
COR-L23/P細胞系相關產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
H-2172細胞系相關產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
NCI H295R細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
MCF7-GFP細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞
KYSE-510細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
EL4細胞系相關產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
H2029細胞系相關產(chǎn)品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
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