"NCI-H660 Cell:人小細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H660 Cell:人小細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存：目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：２-３天換液１次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
NCI-H660 Cell:人小細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
NCI-H660 Cell:人小細(xì)胞癌細(xì)胞系
Hs 940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細(xì)胞、TE10細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞
MCA 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
BEL-7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞
IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞
Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞
OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞
OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞
WM 239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞
Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞
SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞
Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞
CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞
G361-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞
NCI-H660 Cell:人小細(xì)胞癌細(xì)胞系
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞
NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞
NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞
HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞
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關(guān)鍵字： NCI-H660 Cell:人小細(xì)胞癌細(xì)胞系
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