"MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
L 540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞
SHP77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
MFE296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞
Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
LS513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細胞、BC-028細胞、SW756細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細胞、HEK293EBNA細胞、HNE3細胞
LS513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
RetroPack PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
COLO-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
RGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
H-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細胞系
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
OV1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
LS411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞
Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
NCI-H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
A375mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
T47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細胞系
HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞
HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞
CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
C57/B6-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs611T細胞、CCD-112CoN細胞、P3 88 D1細胞
OVCAR.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
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