"MDA-PCa-2b細胞：人前列腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
收到常溫復蘇細胞后，具體操作步驟1)首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。2)用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。3)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。4)靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。5)貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。6)懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。溫馨提醒：1)可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉移至50ml無菌離心管中，備用；細胞首次傳代時，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。2)確認細胞狀態(tài)良好后，應及時將部分細胞凍存，再進行后續(xù)的實驗，避免后期實驗失誤可能發(fā)生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失，影響后續(xù)實驗。建議客戶收到細胞后前3天，100X、200X、400X各拍3張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于后續(xù)和技術支持溝通交流。
我常看到一個比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
G-292細胞系相關產(chǎn)品：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞
RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品：He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
Colo741細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
PK (15)細胞系相關產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
H-2227細胞系相關產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
SK Mel 2細胞系相關產(chǎn)品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
RERFLCMS細胞系相關產(chǎn)品：DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
SW 403細胞系相關產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
SNU368細胞系相關產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
P3X63Ag8653細胞系相關產(chǎn)品：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
GM04679細胞系相關產(chǎn)品：HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
OCI/AML5細胞系相關產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
H889細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
HMC-1細胞系相關產(chǎn)品：ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
ME-180細胞系相關產(chǎn)品：B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞
ME-180細胞系相關產(chǎn)品：B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
751-NA-15細胞系相關產(chǎn)品：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
MDA330細胞系相關產(chǎn)品：Pt K2細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞、ROS-17/2.8細胞
MSF細胞系相關產(chǎn)品：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
H358細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
HT 1376細胞系相關產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
LN-229細胞系相關產(chǎn)品：RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
HT-55細胞系相關產(chǎn)品：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
H-524細胞系相關產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
Hs840_T細胞系相關產(chǎn)品：LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
KM12細胞系相關產(chǎn)品：Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
GES1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
IHH4細胞系相關產(chǎn)品：NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞
QBC(939)細胞系相關產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
TGW-nu細胞系相關產(chǎn)品：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
OV 1063細胞系相關產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
DC 2.4細胞系相關產(chǎn)品：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
U-343MG細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
SW1271細胞系相關產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
NCIH2073細胞系相關產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關產(chǎn)品：SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
NWA細胞系相關產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
STTG1細胞系相關產(chǎn)品：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞
BHK-21細胞系相關產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
C42細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
IPEC-J2細胞系相關產(chǎn)品：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
CCC-HHM-2細胞系相關產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
H358細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
Ku812細胞系相關產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
H920細胞系相關產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
OCI/AML5細胞系相關產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
MDA-MB361細胞系相關產(chǎn)品：DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞
HO8910/PM細胞系相關產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
NCIH23細胞系相關產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
HPAEpiC細胞系相關產(chǎn)品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
SU86_86細胞系相關產(chǎn)品：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
SW 948細胞系相關產(chǎn)品：MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial細胞： 1細胞
RPMI-8226細胞系相關產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic細胞：細胞
BJA-B細胞系相關產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細胞、NE-1細胞、BC-020細胞
QBC-939細胞系相關產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
SUPM2細胞系相關產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
MDCC MSB1細胞系相關產(chǎn)品：MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞
PC-3M細胞系相關產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
SNU-620細胞系相關產(chǎn)品：DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞
SKCol1細胞系相關產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
TPC1細胞系相關產(chǎn)品：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
GM00215A細胞系相關產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
NCIH1666細胞系相關產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
MuM-2C細胞系相關產(chǎn)品：Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
143BTK-細胞系相關產(chǎn)品：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
Hs 274細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
WRL68細胞系相關產(chǎn)品：D-283細胞、BEP2D細胞、SJSA細胞
NCI-H716細胞系相關產(chǎn)品：GM 637細胞、GM 637細胞、HHL-5細胞
Colo741細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-410細胞、Rca-B細胞、NCIH1755細胞
Hs821T細胞系相關產(chǎn)品：NS1細胞、LCLC103H細胞、D10.G4.1細胞
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