"KP4 Thawing人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
KP4 Thawing人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿(mǎn)器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶(hù)遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KP4 Thawing人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞凍存知識(shí)普及：細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-１９６℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度５%.１５%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開(kāi)始為-１到-２℃/min，當(dāng)溫度低于-２５℃時(shí)可加速，到-８０℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-１９６℃)。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
HCC-202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞
A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞
TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞
PECAPJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT細(xì)胞、C518細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞
Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞
Pa17C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞
Hs-606-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES1細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、LP-1細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞
MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細(xì)胞、MDA415細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞
OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
SUDHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
H-2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞
MDA MB 175 VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞
SMA560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞
NOR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞
KP4 Thawing人胰腺癌細(xì)胞系
HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞
451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞
MDCK II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC1細(xì)胞、G-292細(xì)胞、130 T細(xì)胞
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
SNU668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞
BMSC/hBMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-398細(xì)胞、H-820細(xì)胞、251MG細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞
CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8-653細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
Human Embryonic Skin細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞
NCI-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細(xì)胞、SW 48細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞
SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
NCI-H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞
PA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞
PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
KP4 Thawing人胰腺癌細(xì)胞系
Huh 7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
DC2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞
HEC1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞
EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞
H-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞
Y3-Ag1,2,3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞
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