"KP4細胞：人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
TE32細胞系相關產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
MCF-7B細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
TE-85 clone 5細胞系相關產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
HEK (AD293)細胞系相關產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
SKNBE2細胞系相關產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
COS1細胞系相關產(chǎn)品：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
H220細胞系相關產(chǎn)品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
MHCC97H細胞系相關產(chǎn)品：Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
MB468細胞系相關產(chǎn)品：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
H647ell細胞系相關產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關產(chǎn)品：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
FU-97細胞系相關產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
HT-3細胞系相關產(chǎn)品：TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞
OVCAR 433細胞系相關產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
K-562細胞系相關產(chǎn)品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
K-562細胞系相關產(chǎn)品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
UACC 893細胞系相關產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
H-1048細胞系相關產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
A673細胞系相關產(chǎn)品：MKN1細胞、SHI-1細胞、UCW 100細胞
HP615細胞系相關產(chǎn)品：Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
HCe-8693細胞系相關產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
L 929細胞系相關產(chǎn)品：SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
BHK 21細胞系相關產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
DMS 273細胞系相關產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
OCI/AML-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關產(chǎn)品：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
GM2219C細胞系相關產(chǎn)品：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
BL6細胞系相關產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關產(chǎn)品：HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
SNU182細胞系相關產(chǎn)品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
L-M[TK-]細胞系相關產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
Panc-02細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞
Ca-Ski細胞系相關產(chǎn)品：LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
TOV112細胞系相關產(chǎn)品：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
MOLT-16細胞系相關產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
RMS 13細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
GM3570細胞系相關產(chǎn)品：HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
ST2細胞系相關產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
FDCP-1細胞系相關產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
YH-13細胞系相關產(chǎn)品：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
H1993細胞系相關產(chǎn)品：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
WM-266-mel細胞系相關產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
SUM 190細胞系相關產(chǎn)品：SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
H-1385細胞系相關產(chǎn)品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
UMRC2細胞系相關產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
MSTO-211細胞系相關產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
IPEC-J2細胞系相關產(chǎn)品：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
DH82細胞系相關產(chǎn)品：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
D341Med細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
R 1610細胞系相關產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
1301細胞系相關產(chǎn)品：L細胞：細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
SKNBE(1)細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
PJ34細胞系相關產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
OVCA433_Bast細胞系相關產(chǎn)品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
COV362細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
OCI-Ly10細胞系相關產(chǎn)品：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
Leydig細胞系相關產(chǎn)品：CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞
COLO320 DM細胞系相關產(chǎn)品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
SK Mel28細胞系相關產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
HuNS1細胞系相關產(chǎn)品：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
NCIH345細胞系相關產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
U 266細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
KHYG細胞系相關產(chǎn)品：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
HCO細胞系相關產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
Kit225細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
QGY細胞系相關產(chǎn)品：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
RERF-LC-MS細胞系相關產(chǎn)品：NH6細胞、A-498細胞、NCM356細胞
LS174T細胞系相關產(chǎn)品：Rat Lung-65細胞、SHIN-3細胞、MeWo細胞
TE-85 clone 5細胞系相關產(chǎn)品：TE6細胞、MonoMac1細胞、266 Bl細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關產(chǎn)品：J774A.1細胞、143BTK-細胞、373 MG細胞
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