"SHP-77 Thawing人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SHP-77 Thawing人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：３-４天換液１次。
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SHP-77 Thawing人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮生長，少量貼壁
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
TM-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAC-P4C細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞
SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細(xì)胞、TE-5細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
HCT 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
HTh 74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞
NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
Chinese Hamster Ovary細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
LS 1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、LY細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞
BT-325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞
639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞
639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞
Calu-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細(xì)胞、OP-9細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞
USMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT7細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞
SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
SHP-77 Thawing人肺癌細(xì)胞系
Hs 274.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU.812細(xì)胞、HECV細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞
SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
CCC-HIE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細(xì)胞、293 H細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞
MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞
CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞
RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
AAV-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P19細(xì)胞、A1847細(xì)胞、HECV細(xì)胞
NCIH1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細(xì)胞、A-20細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
Tregs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SCC9細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞
NCIH23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
N1E115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞
HONE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞
JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞
NCI-H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL-140細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞、HuT78細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞
SHP-77 Thawing人肺癌細(xì)胞系
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞
H-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞
LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞
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