"SHP-77:人肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OV2008細胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞

RH7777細胞類似產(chǎn)品：：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞

Merwin Plasma Cell tumor-11細胞類似產(chǎn)品：：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞

801-D細胞類似產(chǎn)品：：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

SHP-77:人肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

NPA細胞類似產(chǎn)品：：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞

DHL10細胞類似產(chǎn)品：：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞

C41細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：３-４天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長，少量貼壁

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

OVCAR10細胞類似產(chǎn)品：：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞

LPC-H12細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞

TK+/- (clone 3.7.2C)細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞

NCI-H2591細胞類似產(chǎn)品：：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞

Michigan Cancer Foundation-7細胞類似產(chǎn)品：：WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞

IMR-90細胞類似產(chǎn)品：：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞

6-10B細胞類似產(chǎn)品：：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞

SW 1116細胞類似產(chǎn)品：：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞

OCI-Ly07細胞類似產(chǎn)品：：MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞

NFS-60細胞類似產(chǎn)品：：Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞

TE671/RD細胞類似產(chǎn)品：：WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞

ChaGo K-1細胞類似產(chǎn)品：：UCH1細胞、HIT clone T15細胞、KYSE 510細胞

Panc 4.03細胞類似產(chǎn)品：：WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞

OCILY7細胞類似產(chǎn)品：：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞

SGC-996細胞類似產(chǎn)品：：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞

Hs888Lu細胞類似產(chǎn)品：：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞

Hs888Lu細胞類似產(chǎn)品：：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞

HepG2細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞

Colo741細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞

Human Melanoma Cell Bowes細胞類似產(chǎn)品：：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞

CCRFCEM細胞類似產(chǎn)品：：MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞

SW-48細胞類似產(chǎn)品：：COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞

OCI-Ly7細胞類似產(chǎn)品：：NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞

LA-N-6(OAN)細胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞

SHP-77:人肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

GAK細胞類似產(chǎn)品：：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞類似產(chǎn)品：：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞

PC3細胞類似產(chǎn)品：：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞

NCM356細胞類似產(chǎn)品：：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞

Panc_05_04細胞類似產(chǎn)品：：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞

C2BBe1細胞類似產(chǎn)品：：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞

REC1細胞類似產(chǎn)品：：MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞

Mv.1.Lu細胞類似產(chǎn)品：：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞

P-19細胞類似產(chǎn)品：：HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞

TE9細胞類似產(chǎn)品：：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞

Hi-five細胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

PLC/PRF/5細胞類似產(chǎn)品：：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞

Scott and White No. 13細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞

KMBC細胞類似產(chǎn)品：：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞

Colon-38細胞類似產(chǎn)品：：CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞

SW1116細胞類似產(chǎn)品：：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞

COLO 679細胞類似產(chǎn)品：：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞

D-283 Med細胞類似產(chǎn)品：：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞

Hk-2細胞類似產(chǎn)品：：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞

CCD-19Lu細胞類似產(chǎn)品：：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞

A-875細胞類似產(chǎn)品：：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞

H-1404細胞類似產(chǎn)品：：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞

SU8686細胞類似產(chǎn)品：：BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞

CACO2細胞類似產(chǎn)品：：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞

H-1993細胞類似產(chǎn)品：：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞

Y3-Ag1,2,3細胞類似產(chǎn)品：：HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞

P31FUJ細胞類似產(chǎn)品：：DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞

NSC-34細胞類似產(chǎn)品：：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞

WERI-Rb-1細胞類似產(chǎn)品：：HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞

Neuro 2a細胞類似產(chǎn)品：：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞

LS180細胞類似產(chǎn)品：：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞

C3H10T1/2 clone8細胞類似產(chǎn)品：：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞

Eca-109細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞

UO-31細胞類似產(chǎn)品：：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞

NK62a細胞類似產(chǎn)品：：OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞

HRIF細胞類似產(chǎn)品：：CV-1細胞、SUM149細胞、HPAF-II細胞

NCIH2030細胞類似產(chǎn)品：：DoHH-2細胞、Metastatic Variant 522細胞、SNU387細胞

TK+/- (clone 3.7.2C)細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2106細胞、MGECs細胞、PT-K75細胞

H-1092細胞類似產(chǎn)品：：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞

MCA-38細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞

MAntle cell VERona-1細胞類似產(chǎn)品：：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞

L-428細胞類似產(chǎn)品：：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞

BC-024細胞類似產(chǎn)品：：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞

MDCKII細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞

HL-1細胞類似產(chǎn)品：：HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞

SUNE-1細胞類似產(chǎn)品：：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞

HRA 19細胞類似產(chǎn)品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞

RGC-5細胞類似產(chǎn)品：：B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞

AN3CA細胞類似產(chǎn)品：：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞

Sp2/0-Ag-14細胞類似產(chǎn)品：：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞

BIC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞

alphaTC1 Clone 6細胞類似產(chǎn)品：：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞

NCI-441細胞類似產(chǎn)品：：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞

TFK-1細胞類似產(chǎn)品：：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞

Walker/LLC-WRC256細胞類似產(chǎn)品：：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞

NCI-H1092細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞

Rat-2細胞類似產(chǎn)品：：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞

FRTL-5細胞類似產(chǎn)品：：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞

FRTL-5細胞類似產(chǎn)品：：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞

L細胞類似產(chǎn)品：：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞

Cattle chondrocytes細胞類似產(chǎn)品：：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞

Kit225 K6細胞類似產(chǎn)品：：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞

Hs675T細胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞

H-2198細胞類似產(chǎn)品：：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞

CCK81細胞類似產(chǎn)品：：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞

OCI-Ly 10細胞類似產(chǎn)品：：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞

CEK細胞類似產(chǎn)品：：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞

4T1-LUC細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞

NCI-H-82細胞類似產(chǎn)品：：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞

MDCKII細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞

Malme-3M細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞

MCF/Adr細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞

VP 267細胞類似產(chǎn)品：：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞

NIH-3T3細胞類似產(chǎn)品：：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞

UCD-MLA-144細胞類似產(chǎn)品：：SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞

TFK1細胞類似產(chǎn)品：：ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞

NCTC clone 1469細胞類似產(chǎn)品：：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞

OCI-Ly07細胞類似產(chǎn)品：：MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞

U-87 MG細胞類似產(chǎn)品：：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞

293 F細胞類似產(chǎn)品：：Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞

PC-9細胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞

AMC-HN8細胞類似產(chǎn)品：：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞

SHP-77:人肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCI-H2591細胞類似產(chǎn)品：：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞

P3JHR1細胞類似產(chǎn)品：：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞

ROS17/2.8細胞類似產(chǎn)品：：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞

Hs742T細胞類似產(chǎn)品：：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞

H-220細胞類似產(chǎn)品：：Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞

BPH1細胞類似產(chǎn)品：：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞

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