"NCI-H2023 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H2023 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２次
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H2023 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。【材料和試劑】１)無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太小；５)準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
CHP100細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
PG-4 S+L-細胞系相關產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
C4-2 B細胞系相關產(chǎn)品：AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
HN6細胞系相關產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
CEM-C1細胞系相關產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
OCI-Ly1細胞系相關產(chǎn)品：THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
P388D1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
OKAC1細胞系相關產(chǎn)品：P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
SKNBE(1)細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
BC-027細胞系相關產(chǎn)品：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
TMD-8細胞系相關產(chǎn)品：293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞
Hs 729.T細胞系相關產(chǎn)品：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞
CT26.CL25細胞系相關產(chǎn)品：MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞
WiDr細胞系相關產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
VM-CUB1細胞系相關產(chǎn)品：HSC4細胞、CHG-5細胞、SUDHL1細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、T47D:A細胞、A-875細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
OVCAR-8細胞系相關產(chǎn)品：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
22Rv1細胞系相關產(chǎn)品：MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
HS578細胞系相關產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
IFRS1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
SW 1353細胞系相關產(chǎn)品：Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
SNU-739細胞系相關產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
GTL-16細胞系相關產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
D-341 Med細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
NCI-H2023 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
GM637A細胞系相關產(chǎn)品：HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞
H-1694細胞系相關產(chǎn)品：HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
OAW-42細胞系相關產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
MC26細胞系相關產(chǎn)品：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
HR-8348細胞系相關產(chǎn)品：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
NCI-H1869細胞系相關產(chǎn)品：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
Hs 636.T細胞系相關產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
EJ細胞系相關產(chǎn)品：Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞
NALM-6-M1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
HO-8910細胞系相關產(chǎn)品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
KYSE-30細胞系相關產(chǎn)品：95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
COS-1細胞系相關產(chǎn)品：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
HMEL細胞系相關產(chǎn)品：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
OCI-AML-2細胞系相關產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
MES23.5細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
Balb/c 3T3細胞系相關產(chǎn)品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
P3-X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
HBZY1細胞系相關產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
SW 900細胞系相關產(chǎn)品：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
HMCB細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
C4-2 B細胞系相關產(chǎn)品：AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
SCL I細胞系相關產(chǎn)品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
PLB 985細胞系相關產(chǎn)品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
KOPN-8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
H-1703細胞系相關產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
L 1210細胞系相關產(chǎn)品：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
MDAMB134細胞系相關產(chǎn)品：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
NCI-H2023 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
R 1610細胞系相關產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
SKML-28細胞系相關產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
HLE細胞系相關產(chǎn)品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
FRO 81-2細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞
UM-RC-2細胞系相關產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
HL1細胞系相關產(chǎn)品：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
HT1376細胞系相關產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
MCF12A細胞系相關產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
HFLS-RA細胞系相關產(chǎn)品：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
RFL6細胞系相關產(chǎn)品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
OVCA5細胞系相關產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
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