"NCI-H1993 Thawing人肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
NCI-H1993 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長:貼壁
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時細胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中;2)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù),并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中;2)細胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2—1:6傳代
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有問題時,進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H1993 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
MO59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
NCI-H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞
SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、DU4475細胞、NCI-N87細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、NCI/ADRRES細胞、SW 837細胞
ASH-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
Panc-08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
HEC-151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
NCI-H1993 Thawing人肺癌細胞系
BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
SF-539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
SW-1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
IB-RS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
HCC78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
6T-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
WERI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
BT549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
NCI-H1993 Thawing人肺癌細胞系
PE/CA-PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
ATN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
N1E-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
WM115-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
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