"WM266-4 cell line人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長，此時細(xì)胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
WM266-4 cell line人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細(xì)胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
WM266-4 cell line人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
H-1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細(xì)胞、L02細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞
CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞
MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
WM266-4 cell line人黑素瘤細(xì)胞系
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
Hs-852-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
PC-3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
RAW264細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYK-nu細(xì)胞、CD18細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
OSRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
Hs 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細(xì)胞、A101D細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞
Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
BEL-7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞
PL-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞
OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
MDA-MB-435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs_578t細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞、G402細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
WM266-4 cell line人黑素瘤細(xì)胞系
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、LM8細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞
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