"SW527 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞
675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-428細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞
B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞
BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞
Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞
LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
L02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞、B958細(xì)胞
Jeko1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞
NBL_S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞
SHZ-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、D341細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
SNU-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞
LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞
NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
UPCI-SCC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞
P3/ag細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECCL-1細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
SK-N-BE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8/MOSEC細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
T 98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74Int細(xì)胞、MLA144細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞
Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞、TM-4細(xì)胞
Panc04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92細(xì)胞、NF639細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞
HSC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞
MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
KLM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-4細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
H-345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
Hepatoma 22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190A細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞
WI38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細(xì)胞、WC00059細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞
MDAMB435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞
HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞
LLC PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞
201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
CMK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CHO細(xì)胞
Leukemia L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞
Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞
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