"HCC1143 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCC1143 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞生長:貼壁
接收細胞相關(guān)問題:如不能在收到細胞后及時操作細胞,T25及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在37度過夜,血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升華,請即刻復(fù)蘇細胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境,同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導(dǎo)致細胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下,平衡后,貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細胞可以離心(1000rpm,3min)收集細胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有問題時,進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1143 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
我??吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
L-132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
AMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
H-735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
NCI H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
CCK-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H6c7細胞、H-1581細胞、NPC-039細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細胞、MDA453細胞、B16BL6細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
MESSA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
HFL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞
MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
HCC1143 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
EC-GI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
MPC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
NCI-H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
NOZAWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
EFO 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
SK-MEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
Colo16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
F81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
Panc-08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
MCA 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
Panc 03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞
NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
HCC1143 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
COLO 679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
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