"HCC1806 Thawing人乳腺鱗狀癌細胞系
細胞背景資料:該細胞源自一位患有乳腺髓樣癌的44歲黑人女性,表達WNT7B癌基因,細胞與細胞邊界處有細胞橋粒、微絨毛、張力細絲。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCC1806 Thawing人乳腺鱗狀癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1806 Thawing人乳腺鱗狀癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
HepG2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
A172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細胞、Panc02細胞、HT-55細胞
LN299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細胞、HEC-1B細胞、AD293細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
HOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
HOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
HCC1806 Thawing人乳腺鱗狀癌細胞系
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
HCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
H-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細胞、MV4II細胞、P388細胞
TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞
OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
Panc 04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
Hs 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞
SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞
32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
B95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞
HCC1806 Thawing人乳腺鱗狀癌細胞系
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
JHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
Hs 578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞
P3/NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
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