"NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：NR８３８３(正常大鼠，１９８３年８月３日)來源于肺灌洗時(shí)的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞。細(xì)胞在gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約８-９個(gè)月。隨后，不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個(gè)細(xì)胞克隆并亞克隆NR８３８３細(xì)胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，F(xiàn)c受體，氧化降解；分泌IL-１,TNFbeta和IL-６，可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR８３８３細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素，分泌TGFbeta前體。在博萊霉素刺激下，TGFbe
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：半貼壁生長
細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】１)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；５)準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面，再在鏡下觀察細(xì)胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
細(xì)胞形態(tài)特性：巨噬細(xì)胞
NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
PG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞
Huh 7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、UM2細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.WT細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
MDAPCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞、HS-683細(xì)胞
NCI-H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞
Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
RIN Cl-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞、GM15452細(xì)胞
MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1963細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞
Colo-678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
HDMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞
KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞
H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8402細(xì)胞、TE-10細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞
NCI-SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞
MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞
NCI-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細(xì)胞、SW 48細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞
OCI-Ly03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細(xì)胞、A-253細(xì)胞、MC/9細(xì)胞
SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞
KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
GT1-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY-R細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞、2B4細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
MF2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞
Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞
ATN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞
MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細(xì)胞、IM95細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞
KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
P3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞
HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞
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