"NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：NR８３８３(正常大鼠，１９８３年８月３日)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約８-９個月。隨后，不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR８３８３細胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現(xiàn)出巨噬細胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，F(xiàn)c受體，氧化降解；分泌IL-１,TNFbeta和IL-６，可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR８３８３細胞響應(yīng)博萊霉素，分泌TGFbeta前體。在博萊霉素刺激下，TGFbe
R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
SK-ChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
細胞生長特性：半貼壁生長
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性：巨噬細胞
UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
HPaSteC(HPSC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H-10T1/2細胞、MyLa 2059細胞、HEL-92細胞
CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細胞系
WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
MDA330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞、ROS-17/2.8細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
HL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
H-661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
ESC-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
NRK clone 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
RAW-264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
ANA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
SF17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
ECV 304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
kms 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
MB 157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
H-2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細胞系
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
REC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
REC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
NCIH2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
KM933細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、NCIH1568細胞、HepG2-luc細胞
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