"Vero Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：Vero細(xì)胞株是日本千葉大學(xué)的YasumuraY和KawakitaY從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細(xì)胞常作為轉(zhuǎn)染宿主，用于支原體的檢測(cè)。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
Vero Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Vero Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
SKNBE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb 1細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞
MeT5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細(xì)胞、H2066細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞
32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞
SW780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-21G細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞
CAL-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
SKLMS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC-21H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞
P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
H-2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細(xì)胞、RL-952細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
Vero Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
Keio University-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
NCI/ADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：118 MG細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞、ACCM細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、SNGM細(xì)胞
IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞
AHH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞
HTori:3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞、SCC7細(xì)胞
149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-4細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
P3-X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H250細(xì)胞、JKT1細(xì)胞、SJSA細(xì)胞
MGC803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞、CEM細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-60細(xì)胞、H1781細(xì)胞、GM3569細(xì)胞
CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
Vero Thawing非洲綠猴腎細(xì)胞系
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞
OSC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
D-324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-182細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、H2066細(xì)胞
HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞
NCIH650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2 wt細(xì)胞、T 24細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞
FM-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞
HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞
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