"GT1-1 Thawing小鼠垂體瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:GT1-1為GT1細(xì)胞系的亞克隆,GT1來源于穩(wěn)定表達(dá)SV40大T抗原的轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生的可以分泌促性腺激素釋放激素LHRH的腫瘤。GT1-1細(xì)胞可以表達(dá)pro-LHRHmRNA,并向培養(yǎng)基中分泌LHRH樣的免疫反應(yīng)性的物質(zhì)。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
GT1-1 Thawing小鼠垂體瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
接收細(xì)胞相關(guān)問題:如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞,T25及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在37度過夜,血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升華,請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境,同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下,平衡后,貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細(xì)胞可以離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
GT1-1 Thawing小鼠垂體瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題,很多時(shí)候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞
LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞
293T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-64細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞、SMA560細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞
LICR-HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB468細(xì)胞、38C-13細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞
SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞
McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、Mevo細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞
Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞
C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞
Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
GT1-1 Thawing小鼠垂體瘤細(xì)胞系
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞
BIC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細(xì)胞、TR 146細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞
A9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、A-10細(xì)胞
SCC 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞
ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
VMCUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞、NOR10細(xì)胞
MDCK Type II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC366細(xì)胞、CG4細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
FRO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞、H716細(xì)胞
MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞
CNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細(xì)胞、SP-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
UT-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞、FL62891細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞
LICR-LON-HN6-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
GT1-1 Thawing小鼠垂體瘤細(xì)胞系
HCC-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
WEHI3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294T細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞
QGY-7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞
SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞
Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞
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