"C2C12 Thawing小鼠成肌細胞系
細胞背景資料:該細胞株是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌細胞系的亞株。該細胞分化較快,可形成能收縮的微管,產生特異的肌肉蛋白。在骨形態(tài)形成蛋白(BMP-2)的作用下,該細胞可由成肌細胞分化為成骨細胞。檢測發(fā)現(xiàn)該細胞鼠痘病毒陰性。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
C2C12 Thawing小鼠成肌細胞系
細胞生長:貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細胞時,發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題,究竟是什么原因導致,我們該怎么進行解決?以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題,總結的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過程中細胞裂解,推薦的解決方案:可預期到一定量的細胞死亡,因此細胞的濃度應足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細胞/毫升;2)解凍過程中的問題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng);3)對冷凍液過敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期;4)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長,存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C2C12 Thawing小鼠成肌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經驗總結,這里說一些我個人的經驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結經驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要),關鍵所在是細胞來源,血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;梭形
Karpas 422細胞系相關產品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
HCT 8細胞系相關產品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
CNE-2細胞系相關產品:HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
L 363細胞系相關產品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
H-1836細胞系相關產品:Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關產品:HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
GM03570E細胞系相關產品:SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
NCIH1651細胞系相關產品:KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
BN-CL2細胞系相關產品:SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關產品:PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
HTR8細胞系相關產品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
PC-3/M細胞系相關產品:184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞
Tu-177細胞系相關產品:MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
HFT8810細胞系相關產品:MV 3細胞、CoCL3細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
LS-180細胞系相關產品:COLO678細胞、Institute for Medical Research-90細胞、SiHa細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關產品:95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
HPB-ALL細胞系相關產品:Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
CHP 126細胞系相關產品:H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
Karpas-299細胞系相關產品:HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
TFK-1細胞系相關產品:PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
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H510細胞系相關產品:OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關產品:HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
UMUC-3細胞系相關產品:P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
C32r細胞系相關產品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
C2C12 Thawing小鼠成肌細胞系
NK-92細胞系相關產品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
Hs 578.Bst細胞系相關產品:H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
U-CH1細胞系相關產品:CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
H1341細胞系相關產品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
SK-MEL-24細胞系相關產品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
SK-MES細胞系相關產品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
ND7/23細胞系相關產品:BA/F3細胞、LN229細胞、P3X63 Ag8細胞
SCaBER細胞系相關產品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
PTK 1細胞系相關產品:Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞
NCI747細胞系相關產品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
HuH28細胞系相關產品:IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
DMS 153細胞系相關產品:Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
SUM-190細胞系相關產品:NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞
HEK 293-F細胞系相關產品:TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關產品:Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
NCIH1373細胞系相關產品:H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞
HGF-1細胞系相關產品:PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
Pt K1細胞系相關產品:Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
MBT2細胞系相關產品:PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
OCI-Ly19細胞系相關產品:T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
ML-2細胞系相關產品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
ONS-76細胞系相關產品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
NeHepLxHT細胞系相關產品:SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
SKNBE-1細胞系相關產品:SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞
PC-10細胞系相關產品:NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
NCIH889細胞系相關產品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
CL34細胞系相關產品:HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
Hs940.T細胞系相關產品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
RMa-bm細胞系相關產品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
CEMC7細胞系相關產品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
EL-4細胞系相關產品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
IEC-6細胞系相關產品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
MCF-7/ADR細胞系相關產品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
C2C12 Thawing小鼠成肌細胞系
RD-ES細胞系相關產品:BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
OCIAML2細胞系相關產品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
HS 445T細胞系相關產品:MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
HT-22細胞系相關產品:HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
CCRF.CEM細胞系相關產品:OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關產品:Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
HuP-T4細胞系相關產品:LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
95C細胞系相關產品:BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
RGB細胞系相關產品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
NPC-TW 01細胞系相關產品:SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
SUDHL8細胞系相關產品:OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
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