"P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
細胞背景資料:P19細胞株是從C3H/He小鼠中誘導(dǎo)的惡性畸胎瘤中建立的。該細胞在含有0.1mM的培養(yǎng)基中可高效率地克隆。該細胞具有多能性,在500nM維A酸誘導(dǎo)下可以分化成神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)樣細胞;在0.5%~1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下,分化形成心臟和骨骼肌樣細胞,但不形成神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)樣細胞;在DMSO和維A酸同時存在時,細胞的分化與只有維A酸一樣。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
細胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】1)掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
預(yù)防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
Mono-Mac-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞
Panc-05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
PANC-10-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
CMT93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細胞、NCI-H719細胞、NCI-H1975細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細胞、LAN6細胞、BSC1細胞
SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
C-4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
OC 316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
OCI-LY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
F-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
Panc2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
M059J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
KU1919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
QGP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
KU1919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
NCI-H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
MM1-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
M-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞
EB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
SKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞
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