"P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:P19細胞株是從C3H/He小鼠中誘導(dǎo)的惡性畸胎瘤中建立的。該細胞在含有0.1mM的培養(yǎng)基中可高效率地克隆。該細胞具有多能性,在500nM維A酸誘導(dǎo)下可以分化成神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)樣細胞;在0.5%~1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下,分化形成心臟和骨骼肌樣細胞,但不形成神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)樣細胞;在DMSO和維A酸同時存在時,細胞的分化與只有維A酸一樣。
UMUC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
HT22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞
SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
細胞生長特性:貼壁生長
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
KPL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
NCI-H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
H22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
NMCG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
Hs-695-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
RPMI #8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
HCC1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
BMSCs(mBMSCs)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
C-Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
MRC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細胞系
MV4II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
2PK-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、N1E-115細胞、Malme3M細胞
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