"C-33 A Thawing人子宮頸癌細胞系
細胞背景資料：C-３３A細胞株是N. Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細胞株(參見ATCC CRL-１５９４和ATCC CRL-１５９５)中的一株。 細胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細胞形態(tài)。 連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。 存在成視網膜細胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常。 P５３表達上調，且有一個２７３位密碼子的點突變導致Arg -> Cys的替換。 人乳頭瘤病毒DNA及RNA陰性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
C-33 A Thawing人子宮頸癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C-33 A Thawing人子宮頸癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
H-520細胞系相關產品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
Hs 822.T細胞系相關產品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
SkMel31細胞系相關產品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
BL-6細胞系相關產品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
SKBr3細胞系相關產品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
NRK-52E細胞系相關產品：Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
NCI-H322T細胞系相關產品：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
MSC細胞系相關產品：CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
OVCA-420細胞系相關產品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
NCIH740細胞系相關產品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
SK-BR3細胞系相關產品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
T HEECs細胞系相關產品：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞
RH35細胞系相關產品：Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
KM12-SM細胞系相關產品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
OVCA433_Bast細胞系相關產品：AE 1201細胞、OCUM-1細胞、AN3-CA細胞
FHL 124細胞系相關產品：38C13細胞、3T3細胞、MRC9細胞
WM115-mel細胞系相關產品：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
SU8686細胞系相關產品：BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
H1666細胞系相關產品：Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
MyLa2059細胞系相關產品：SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
HMCB細胞系相關產品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
HMCB細胞系相關產品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
D341 Med細胞系相關產品：A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
U14細胞系相關產品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
INS1-E細胞系相關產品：PLA801-95D細胞、WEHI 3B細胞、COLO 699細胞
Ku812細胞系相關產品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
C-33 A Thawing人子宮頸癌細胞系
Mia PACA 2細胞系相關產品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
NCIH2009細胞系相關產品：FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞
OVCAR10細胞系相關產品：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
SK-MEL-5細胞系相關產品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
COLO-320-HSR細胞系相關產品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
MHCC97-H細胞系相關產品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
MCA38細胞系相關產品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
EFM-192C細胞系相關產品：C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
NCIH1436細胞系相關產品：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關產品：GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
HPAFII細胞系相關產品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
DH-82細胞系相關產品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
OAC-P4C細胞系相關產品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
SBC5細胞系相關產品：NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞
HEK-A細胞系相關產品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
Hs683細胞系相關產品：293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
Ca761細胞系相關產品：NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
Lu-99A細胞系相關產品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
HFF細胞系相關產品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
HCC-1954細胞系相關產品：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
H838細胞系相關產品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
H2170細胞系相關產品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
OV1-P細胞系相關產品：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞
H-460細胞系相關產品：GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
SUM-102PT細胞系相關產品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
G519細胞系相關產品：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
LN 382細胞系相關產品：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
OVCAR8細胞系相關產品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
Hs600T細胞系相關產品：SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關產品：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
PC3M-IE8細胞系相關產品：NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
LAD 2細胞系相關產品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
C-33 A Thawing人子宮頸癌細胞系
HCC2157細胞系相關產品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
NCI-H78細胞系相關產品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
NCI-H78細胞系相關產品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
MDA-157細胞系相關產品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
WM451Lu細胞系相關產品：HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
NCI-H1155細胞系相關產品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產品：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
HCC-4006細胞系相關產品：SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞
L-Wnt3A細胞系相關產品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
CoC1細胞系相關產品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
Pan02細胞系相關產品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
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