"ME-180 Thawing人子宮頸表皮癌細胞系
細胞背景資料:這株細胞來源于一個細胞集落不規(guī)則沒有顯著角質化的侵染性鱗狀細胞癌。 單層培養(yǎng)的細胞間可以觀察到帶狀連接,也注意到有細胞質張力絲。 1970年發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。 腫瘤壞死因子(TNF)α抑制ME-180的生長。 這株細胞含有人乳頭瘤病毒(HPV)DNA,與HPV-39的同源性高于HPV-18。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
ME-180 Thawing人子宮頸表皮癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網(wǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ME-180 Thawing人子宮頸表皮癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
我??吹揭粋€比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
BLO 11細胞系相關產品:COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
CA 46細胞系相關產品:D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
TYKnu細胞系相關產品:NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
HO-8910 PM細胞系相關產品:CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞
HS940細胞系相關產品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
2780細胞系相關產品:aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
NB-9細胞系相關產品:LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
HPAFII細胞系相關產品:UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
C-6細胞系相關產品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
BSC1細胞系相關產品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
SU-DHL-16細胞系相關產品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關產品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
PBL細胞系相關產品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關產品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
BHP-10細胞系相關產品:SK-Mel 2細胞、CATHa細胞、BJA-B1細胞
NCI-H748細胞系相關產品:ARH 77細胞、NCI-H508細胞、PC-3M-2B4細胞
OLN93細胞系相關產品:Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
HEK293S細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞
L-6 myoblast細胞系相關產品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
HSC1細胞系相關產品:PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞
Chang Cells細胞系相關產品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
DMS 79細胞系相關產品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
H-4細胞系相關產品:MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
143B細胞系相關產品:JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
AN3 CA細胞系相關產品:BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
UM-UC3細胞系相關產品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
ME-180 Thawing人子宮頸表皮癌細胞系
SK-Mel 2細胞系相關產品:GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
SEM細胞系相關產品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
H4IIE細胞系相關產品:H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
P30OHK細胞系相關產品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
NCI-H226細胞系相關產品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
H-2228細胞系相關產品:VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
FU-97細胞系相關產品:NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
KLM1細胞系相關產品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
MC3T3-L1細胞系相關產品:C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
SNU-C2A細胞系相關產品:AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關產品:VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
TU 686細胞系相關產品:NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
Hs578Bst細胞系相關產品:RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
KE-37細胞系相關產品:KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
Cloudman M3細胞系相關產品:Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
BpRcl細胞系相關產品:HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
OVCAR420細胞系相關產品:SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
Scott and White No. 13細胞系相關產品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
HOS/MNNG細胞系相關產品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
Ca9-22細胞系相關產品:C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞
Leukemic 1210細胞系相關產品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
OVCA433細胞系相關產品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
CAL 39細胞系相關產品:MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞
5637細胞系相關產品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
UMRC-2細胞系相關產品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
CAL-62細胞系相關產品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
Bac1 2F5細胞系相關產品:X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
MM1-S細胞系相關產品:NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞
SUM-149細胞系相關產品:RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞
Karpas 422細胞系相關產品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
NCI-H2171細胞系相關產品:AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
ME-180 Thawing人子宮頸表皮癌細胞系
Kato-III細胞系相關產品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
HCC-2108細胞系相關產品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
MM-1S細胞系相關產品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
CCD-33Co細胞系相關產品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
NWA細胞系相關產品:NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
SW-1783細胞系相關產品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
RCC-JF細胞系相關產品:HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關產品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
GM3570細胞系相關產品:HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
MHHCALL2細胞系相關產品:SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
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