"MHCC97-L Thawing低轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞背景資料：來源于中山醫(yī)院，生長較緩慢
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MHCC97-L Thawing低轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞生長：貼壁
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MHCC97-L Thawing低轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
NALM-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
SK-MEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
RKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞
HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
B 95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞
MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細胞、HFLS-OA細胞、NCIH1770細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細胞、UMNSAH-DF 1細胞、DMS 79細胞
EFM-192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞
NCI-SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
MHCC97-L Thawing低轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
P3JHR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
CV-1.K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞
SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
Mia PACA 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
MHCC97-L Thawing低轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
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