"HCCLM3 Thawing高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCCLM3 Thawing高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞生長：貼壁
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCCLM3 Thawing高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標(biāo)準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
AR42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
UCH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞
RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
J774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細胞、HT-1376細胞、Jurkat細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、G292細胞、N87細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
BrCL15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
HCCLM3 Thawing高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
NCI H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
CHG-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
MLA144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞
COLO 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
AAV-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P19細胞、A1847細胞、HECV細胞
SW-948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
Anglne細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
Mono Mac 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
NCIH146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞
HCCLM3 Thawing高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
Hs 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
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