"HCC827 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：這株細(xì)胞建于１９９４年三月。這株肺腺癌在EGFR酪酸激酶區(qū)域有一個獲得性突變(E７４６-A７５０缺失)?；颊咴冢玻禋q到２６歲時每個月抽１包煙。在診斷前１２年不再抽煙。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HCC827 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時; 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化５分鐘。１：２。４-５天長滿。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時，動作要輕，以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC827 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞
SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
IAR-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞
OP-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞
SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
CCRF-CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞、Alexander細(xì)胞
MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞
HCC827 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
S180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞
Hs 852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 82細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、751-NA細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞
NCIH1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM1細(xì)胞、H295R-S1細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞
NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞
P3-X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 32細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞
NB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly7細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
HCC827 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞
NIE-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細(xì)胞、Hs852細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞
TU 686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NF639細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞
WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞
HARA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCCT1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞
HECCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細(xì)胞、OK細(xì)胞、H-1694細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
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