"NCI-H1650 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是從一名２７歲白人男性（１０年煙齡）支氣管肺泡癌患者的胸腔積液中分離得到的。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H1650 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：４-１：６傳代；２-３天換液１次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H1650 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞
HSAS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEM15A細(xì)胞、NSH細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC7721細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞
NK62a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-1063細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞
WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞
L Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK1細(xì)胞、FRO細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8/V細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細(xì)胞、KG-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
FU-OV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH526細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
HSAS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞
PA-TU S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322T細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞
CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞
NCI-H1650 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
UMUC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
B-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-86-86細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞、H1975細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
RSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞
SF767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
NCI-H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細(xì)胞、HCT116細(xì)胞、Fao細(xì)胞
HeLa S-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
CD 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞
SF763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞、PBMC細(xì)胞
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞
EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞
NPA-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC92A細(xì)胞、H-4細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞
C8D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞
LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H128細(xì)胞、HASMC細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞
U-87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFHL-2細(xì)胞、A375細(xì)胞、T98 G細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
FLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs68細(xì)胞、PC10細(xì)胞、SNU484細(xì)胞
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
NCI-H1650 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞
CMK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞
L cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞
PTK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
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