"PLA-801D Thawing人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞系
細胞背景資料:這是一株高轉(zhuǎn)移肺癌。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
PLA-801D Thawing人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網(wǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PLA-801D Thawing人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
WRL-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
MPC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
I90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞
T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
SC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
VK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細胞、A 2058細胞、VM Cub 1細胞
NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG-3細胞、COR-L279細胞、THEECs細胞
NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
PC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
WERI-Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
PLA-801D Thawing人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞系
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
KYSE 270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
EHEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
NCI-H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
H-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
HTori-3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
SL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
Lu99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
HGMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
COLO-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
PLA-801D Thawing人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞系
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
ME 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
H-2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
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