"NCI-H446 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞是１９８２年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種，表達神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比，該細胞c-mycDNA序列擴增約２０倍，RNA增加１５倍。最初傳代培養(yǎng)基用含有５%FBS的RPMI１６４０，另外添加１０nM化可的松、０.００５mg/ml胰島素、０.０１mg/ml轉(zhuǎn)鐵
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H446 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預熱的培養(yǎng)基中；２)不適當?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H446 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁/懸浮生長，混合
我常看到一個比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
CT26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
BT483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
HMEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞
MOLT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
Cloudman M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細胞、HDQP1細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細胞、ECC-1細胞、NCIH1694細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
MDA436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
NIH:OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞
HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
NCI-H446 Thawing人小細胞肺癌細胞系
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
H-548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
BALB/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
NRK-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
CAL-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
Wistar Institute-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
NCI-H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
NCI-H446 Thawing人小細胞肺癌細胞系
HeLa.S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
RIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AKR細胞、H-2081細胞、H8細胞
HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
HuH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
HTh74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
NCI-H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
CCC-HPF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
"