"Ramos Suspended人B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過(guò)高時(shí)，易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細(xì)胞傳代時(shí)建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化，對(duì)于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化，細(xì)胞密度過(guò)高超過(guò)80%時(shí)，采用分步消化法。胰酶儲(chǔ)存在-20°C，解凍在4°C進(jìn)行，次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機(jī)會(huì)。胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個(gè)關(guān)鍵步驟：消化過(guò)度細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，細(xì)胞會(huì)成片脫落，嚴(yán)重影響細(xì)胞活性，并有部分細(xì)胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會(huì)損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對(duì)消化液的敏感性不同，胰酶消化的時(shí)間也會(huì)有差異。胰酶消化時(shí)間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲(chǔ)存時(shí)間，胰酶的儲(chǔ)存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。對(duì)于新購(gòu)買的細(xì)胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時(shí)間，可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓，記錄消化時(shí)間，下一次操作參考之前的記錄來(lái)控制時(shí)間即可。
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Ramos Suspended人B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞，可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代，部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟：①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧；⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟７-９不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
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細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
以下對(duì)初次培養(yǎng)細(xì)胞人員來(lái)說(shuō)，是非常好的開(kāi)門教程：準(zhǔn)備室的設(shè)備：?jiǎn)握麴s水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜(放置未消毒物品)、儲(chǔ)品柜(放置消毒過(guò)的物品)、包裝臺(tái)；配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(jì)(測(cè)量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)；培養(yǎng)室的設(shè)備：液氮罐、儲(chǔ)品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-８０℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)(書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)記錄)；必須放在無(wú)菌間的設(shè)備：離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO２孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、４℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無(wú)菌室的滅菌：定期打掃無(wú)菌室：每周打掃一次，先用自來(lái)水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等，然后用３‰來(lái)蘇爾或者新潔爾滅或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌：先用３‰新潔爾滅擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外燈照射；實(shí)驗(yàn)前滅菌：打開(kāi)紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各２０-３０分鐘；實(shí)驗(yàn)后滅菌：用７５％酒精(３‰新潔爾滅)擦拭超凈臺(tái)、邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái)；實(shí)驗(yàn)人員的無(wú)菌準(zhǔn)備：肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦凈雙手。
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
Ha Fe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1008細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞
Mhh-Call 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2-293細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
D10.G4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-126細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞
CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
SW-1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa/S3細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞
NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞
SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM1900細(xì)胞、MES 13細(xì)胞、769P細(xì)胞
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Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
SW-579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細(xì)胞、M-G63細(xì)胞、MAVER細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
ATC241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080.T細(xì)胞、CA922細(xì)胞、MDBK細(xì)胞
OV-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C127細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞
M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
CCRF CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81-1細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞
293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
H35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、RN細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞
DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞
NCI-H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞
HCC1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞
BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞
WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞
BGC823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、MLMA細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞
HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞
SBC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M[TK-]細(xì)胞、RPE1細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
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TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞
SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
SUM102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPAE細(xì)胞、GS9L細(xì)胞、H2.35細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞
HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞
SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞
DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE70細(xì)胞、N-9細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
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