"Pfeiffer Suspended人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Pfeiffer Suspended人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
CAL-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
1301細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
CHO-Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞
細胞生長特性：懸浮生長
Pfeiffer Suspended人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞系
細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣
【凍存細胞操作】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０(７)/ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO) 或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃/min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞操作】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r/min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０(７)/ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０(５)/ml數(shù)量。
Hs 729.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞
OCI-LY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞
Hs-600-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
T HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞
HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
Pfeiffer Suspended人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞系
67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
MOLT 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
QGP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
HT22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞
Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
HIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞
Hs863T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
EnCa1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
NUGC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
BEND細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
OCI-Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
Pfeiffer Suspended人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞系
MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
FRTL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
BJA-B-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
H-548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細胞、HeLa/S3細胞、Cates 1B細胞
P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細胞、NCIH23細胞、HP615細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Ku812細胞、FRhK4細胞
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