"EFO-27 Adherent人卵巢腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EFO-27 Adherent人卵巢腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
MKN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
ZR-75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
EFO-27 Adherent人卵巢腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細胞，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學(xué)者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當(dāng)大，對細胞的傷害也是很大的。
SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
Saos2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
MV4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
VMM5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
IPAM-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
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U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
NCI-H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
NCI-H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
NCI-H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
NBL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
KP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
AQ-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
HUCCT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
Nb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
SV40 MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
EFO-27 Adherent人卵巢腺癌細胞系
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
RAW2647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、hFOB 1.19細胞、NSC34細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、BE(2)M-17細胞、NCI H69細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細胞、WM266mel細胞、VMCUB-1細胞
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