"EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Panc-327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-12細(xì)胞、SN12C細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞
HEL 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
CF-PAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2452細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細(xì)胞系
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞
HCC0070細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞
RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
P 815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細(xì)胞、SNU354細(xì)胞、EU-3細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
CHG5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞
253J-Bladder-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞
PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞
A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞
H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞
KU 19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞
HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細(xì)胞、HuT78細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞
CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞
HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
EA.Hy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞、P36細(xì)胞
SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞
NCM-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2227細(xì)胞、H-220細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
HPC-Y5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131A細(xì)胞、H1694細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞
Panc203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細(xì)胞系
Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
C3H-10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細(xì)胞、ATN1細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞
Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞
H-3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
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