"L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
MDA MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS-9L細胞、T-ALL1細胞、KMST-6細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細胞，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當大，對細胞的傷害也是很大的。
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
P3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
SKMel-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
Kupffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細胞系
Adeno 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
MDCK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
Colon38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
Hs822T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
HNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
HEK293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
NE1-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
ECV 304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
NBL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
H-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞
BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
PANC-04-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞
HEK293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞
NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
Tca8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞
PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
Plaepi 34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細胞系
Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
MPC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
aNK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
RIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AKR細胞、H-2081細胞、H8細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
SKG-3a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細胞、SKMES-1細胞、IPLB-Sf21細胞
CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細胞、AAV293細胞、Mevo細胞
SKMel-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細胞、Hs-729-T細胞、Duck embryo細胞
"