"A-9 Adherent小鼠皮下結締組織細胞系
細胞背景資料：皮下結締組織；自發(fā)永生；雄性；C３H/An
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-9 Adherent小鼠皮下結締組織細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明：成纖維細胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質合成速度降低，已有蛋白質結構變化，特異蛋白質成份出現(xiàn);同時，細胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?，F(xiàn)象，常見的細胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中，因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導致一部分細胞死去，稱為細胞的病理死亡，或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡；細胞毒性是由細胞或者化學物質引起的單純的細胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細胞死亡機理，如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況，一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡，是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程，無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用，在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結果將是可怕的：凋亡不足時，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
L23/P細胞系相關產(chǎn)品：ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
NCIH1792細胞系相關產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA MB 361細胞系相關產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
SKNBE2細胞系相關產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
TM4細胞系相關產(chǎn)品：UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞
細胞生長特性：貼壁
A-9 Adherent小鼠皮下結締組織細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Hep 3B2細胞系相關產(chǎn)品：JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞
MDA-MB-415細胞系相關產(chǎn)品：NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關產(chǎn)品：SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
D10.G4.1細胞系相關產(chǎn)品：CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
CORL26細胞系相關產(chǎn)品：WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
675T細胞系相關產(chǎn)品：L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
NCIH1355細胞系相關產(chǎn)品：HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
MyLa 2059細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
GM01232E細胞系相關產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
CCRF-CEM細胞系相關產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
WM-2664細胞系相關產(chǎn)品：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞
A-9 Adherent小鼠皮下結締組織細胞系
Normal Rat Kidney細胞系相關產(chǎn)品：526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
SUDHL5細胞系相關產(chǎn)品：T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
SUDHL5細胞系相關產(chǎn)品：T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
VCaP細胞系相關產(chǎn)品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品：GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
RL細胞系相關產(chǎn)品：SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關產(chǎn)品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
G519細胞系相關產(chǎn)品：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
MT4細胞系相關產(chǎn)品：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
MCA205細胞系相關產(chǎn)品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
HEC-1-B細胞系相關產(chǎn)品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
RPMI 1788細胞系相關產(chǎn)品：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
MGH-U3細胞系相關產(chǎn)品：RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
4T1-LUC細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
NCI-H1436細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞
MC116細胞系相關產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
2E8細胞系相關產(chǎn)品：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
MM1-S細胞系相關產(chǎn)品：NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞
SK HEP 01細胞系相關產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
PC-9/S1細胞系相關產(chǎn)品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
U-251MG細胞系相關產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
NPA-87細胞系相關產(chǎn)品：RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
HCC1143細胞系相關產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
SK-HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
1E8-H細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
J111細胞系相關產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
Hs 819.T細胞系相關產(chǎn)品：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
HTR-8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
T-ALL1細胞系相關產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
HIT T15細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
EAHY-926細胞系相關產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
Hs 746.T細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
CAL-39細胞系相關產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
HCV-29細胞系相關產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
MC 116細胞系相關產(chǎn)品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
HEK 293T/17細胞系相關產(chǎn)品：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞
HDLM2細胞系相關產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
P31-FUJ細胞系相關產(chǎn)品：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
SCLC21H細胞系相關產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
b.End3細胞系相關產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
A-9 Adherent小鼠皮下結締組織細胞系
SupT1細胞系相關產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
H774細胞系相關產(chǎn)品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
CCD-966SK細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
HTh 74細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
L5178-R細胞系相關產(chǎn)品：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
GM07404細胞系相關產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
293-F細胞系相關產(chǎn)品：PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞
V79-GalK1細胞系相關產(chǎn)品：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
NK 10a細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
DMS-153細胞系相關產(chǎn)品：H2052_MM細胞、SK.MEL.2細胞、MFE280細胞
T84細胞系相關產(chǎn)品：A-2780細胞、COLO201細胞、HuLEC-5a細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關產(chǎn)品：SW620細胞、MUG-Chor1細胞、MS751細胞
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