"B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料:黑色素瘤;雄性;C57BL/6
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復(fù)吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
SKMel-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
細胞生長特性:貼壁
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)相關(guān)培養(yǎng)基選購基本指南:如何選擇培養(yǎng)基:經(jīng)常聽到有人問,這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單,也可以好復(fù)雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫,那很簡單,問供應(yīng)商就行了。或者找到相關(guān)的文獻,作為參考。培養(yǎng)基這么多種,要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的,或者是專門針對某一種細胞的,如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基, 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的,也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應(yīng)商推薦,然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品:首先,當然需要找對品牌,其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商,針對自己所養(yǎng)的細胞,咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關(guān)于培養(yǎng)基品牌,目前公司所知道的高校實驗室有些同學(xué)在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品,也有同學(xué)在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用;MEM:成分簡單,貼壁細胞;DMEM:分高糖型和低糖型;IDMEM:適合細胞密度低,生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選,DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細胞的篩選培養(yǎng);RPM1640:應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng),主要針對淋巴細胞,也適合其他細胞;199、109培養(yǎng)基:成分齊全,培養(yǎng)效果較好;F10培養(yǎng)基:適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng);F12培養(yǎng)基:適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng);McCoy’s5A(chǔ)培養(yǎng)基:特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。
OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
GM637A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞
OVCA 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
LN299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
Hs-611-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
NCI-H441-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
RPMI 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
MDA-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
H-2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
HDF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞
H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
AR42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
A-72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細胞、aTC1 Clone 6細胞、NU-GC-4細胞
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
LAN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞
IHH-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
Hs-695-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 30細胞、KNS81細胞、SCaBER細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86細胞、TM4細胞、MRC-V細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、CHO K1細胞、SKN-AS細胞
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