"A-427 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：肺腺癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-427 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
Line 207細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞
Evsa T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞
細胞生長特性：貼壁
A-427 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
C-4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
H-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
HEp-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
SF-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
SW 962細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
MFE296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
A-427 Adherent人肺腺癌細胞系
RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
IMR32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
NPC-TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
HLFa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
WM 239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
WM266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞
ECC12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
NCI-H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
A 375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
KP 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
A-427 Adherent人肺腺癌細胞系
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞
293T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
SVEC4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細胞、NT2-D1細胞、HT-1197細胞
MDA-MB-231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細胞、LN 382細胞、MHH-CALL2細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細胞、EFO 27細胞、MC-4細胞
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