"Z310 Adherent大鼠脈絡從上皮細胞系
細胞背景資料:脈絡從;上皮;SV40永生化;SD大鼠
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Z310 Adherent大鼠脈絡從上皮細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據細胞株數(shù)據單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內。依據細胞種類和濃度,于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
CWR22Rv1細胞系相關產品:NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
NCI-SNU-216細胞系相關產品:KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
SW-962細胞系相關產品:H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
JHH7細胞系相關產品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
10RGB細胞系相關產品:OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞
NCI-322細胞系相關產品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
細胞生長特性:貼壁
Z310 Adherent大鼠脈絡從上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
HCC-1419細胞系相關產品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞
MB231細胞系相關產品:MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
RBE4細胞系相關產品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
NW38細胞系相關產品:H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
293 EBNA細胞系相關產品:Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關產品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
BC-021細胞系相關產品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
Caov-3細胞系相關產品:BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
HGE細胞系相關產品:Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關產品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
SKCol1細胞系相關產品:AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
SK-MES細胞系相關產品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關產品:2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
Z310 Adherent大鼠脈絡從上皮細胞系
HS 1.Tes細胞系相關產品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
Hs675細胞系相關產品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
H2081細胞系相關產品:hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
H2081細胞系相關產品:hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
32D CL3細胞系相關產品:NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
A-704細胞系相關產品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
A2780CP細胞系相關產品:SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
NCM460細胞系相關產品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
SK.MEL.5細胞系相關產品:Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
Uhth-74細胞系相關產品:HOS (TE85, Clone F5)細胞、P30-OHK細胞、OSKM-1細胞
PL9細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
TE 32.T細胞系相關產品:SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
HCe-8693細胞系相關產品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關產品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關產品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
ZR-75-30細胞系相關產品:EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
SKMES細胞系相關產品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
NCI-H64細胞系相關產品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
SJSA1細胞系相關產品:L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
SF767細胞系相關產品:A2780CP70細胞、TE14細胞、KE 37細胞
NPC-TW 01細胞系相關產品:SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
alphaTC clone 6細胞系相關產品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
TE3A細胞系相關產品:U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞
NK10a細胞系相關產品:HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
RBL-2H3細胞系相關產品:EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
138MG細胞系相關產品:TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關產品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
ECC-10細胞系相關產品:LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
P 3 HR 1細胞系相關產品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
L-6細胞系相關產品:L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
KNS62細胞系相關產品:LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
HPAF/CD18細胞系相關產品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
Ly10細胞系相關產品:SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
Hce8693細胞系相關產品:UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
CAL-120細胞系相關產品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
OV 1063細胞系相關產品:Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
HCT 15細胞系相關產品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
KE-39細胞系相關產品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關產品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
H661細胞系相關產品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
T_T_細胞系相關產品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
M2-10B4細胞系相關產品:CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
Z310 Adherent大鼠脈絡從上皮細胞系
QGY-7701細胞系相關產品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關產品:MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
H23細胞系相關產品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
MARC-145細胞系相關產品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
HOCF細胞系相關產品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
HASMC細胞系相關產品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
NCI-H2126細胞系相關產品:NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
LLC-MK2細胞系相關產品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
LS-174細胞系相關產品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
MA-c細胞系相關產品:H69/P細胞、SNU-119細胞、KYSE 510細胞
SUM-159PT細胞系相關產品:Hs683細胞、DU145細胞、SUM-52-PE細胞
RBE4細胞系相關產品:B95-8細胞、CA46細胞、HBE135-E6E7細胞
"