"Sc-1 Adherent小鼠胚胎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:胚胎;自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Sc-1 Adherent小鼠胚胎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
Hs294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細(xì)胞、DanG細(xì)胞、J-82細(xì)胞
MCF 10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
Sc-1 Adherent小鼠胚胎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞
MDA.MB.231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
GDM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-FHCRC細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞
Sc-1 Adherent小鼠胚胎細(xì)胞系
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
SKMEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-134細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞、MV4II細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
SUM-190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1355細(xì)胞、FL62891細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
PC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
HSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞
MOLP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
BMSC/hBMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-398細(xì)胞、H-820細(xì)胞、251MG細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞
P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
NCIH322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1116細(xì)胞、H-865細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞
HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
MTC-TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞
CL MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL 1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
Hep II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細(xì)胞、Anglne細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞
Sc-1 Adherent小鼠胚胎細(xì)胞系
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
HS-940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、HSF2細(xì)胞
ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Farage細(xì)胞
N1E-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87MG細(xì)胞、95-D細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞
MDA.MB.231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞
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