"SF539 Adherent人膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料:膠質(zhì)瘤;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SF539 Adherent人膠質(zhì)瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
NCI H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
細胞生長特性:貼壁
SF539 Adherent人膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
Cloudman M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
G361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
RGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
H-1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
LS174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
AM38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
SF539 Adherent人膠質(zhì)瘤細胞系
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
ACCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞
MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
SJSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
Mia PACA 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
IPI-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
Panc_02_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞
SK-N-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
Tca-8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
FRTL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞
HNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
A204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
LC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
WERIRb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細胞、HCC0070細胞、Ly18細胞
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
SF539 Adherent人膠質(zhì)瘤細胞系
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
HBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3細胞、LS 174T細胞、LICCF細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、GDM1細胞、NBL_S細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細胞、H-295細胞、HRCEC細胞
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