"HCC2185 Adherent人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
細胞背景資料：轉(zhuǎn)移性小葉乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCC2185 Adherent人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞
Madison 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LA-N-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
細胞生長特性：貼壁
HCC2185 Adherent人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
RPMI8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
CHO-Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
Lu99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
HUT28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
SU-DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
JVM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
HCC2185 Adherent人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
SV-HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞
MSTO-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
NCIH69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞
GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
LMH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞
COR-L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞
CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
UPCI:SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
NCI-SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞
PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
786.O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞
Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
H647ell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
P116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
LC1/Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞
KM H-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
BT-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
HCC2185 Adherent人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM39細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、HuH-6細胞
Ca9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C643細胞、Madison 109細胞、Hs 706.T細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、EAC細胞
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