"HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：轉(zhuǎn)移性小葉乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
KP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細(xì)胞、PAa細(xì)胞、NRCC細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞
FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞
Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC-11細(xì)胞、SW527細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞
HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
CX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH7777細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞、H-716細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞系
H2.35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNT-229細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞
Nb-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞、CL40細(xì)胞
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
CEM-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞
CEM-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞
Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
130 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細(xì)胞、3396細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞
SKMEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞
LMH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞
NOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞
J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞
H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞
NCI-H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-T4細(xì)胞、MCA205細(xì)胞、BT 20細(xì)胞
Tu-686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞
BOWES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
CAL 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞
IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞
Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞
AMJ2C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細(xì)胞、BE2C細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞
HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞
OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞系
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞、HT-3細(xì)胞
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC-11細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、H196細(xì)胞
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