"B104 [Rat neuroblastoma] Adherent大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:神經(jīng)母細胞瘤;BDIX
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
B104 [Rat neuroblastoma] Adherent大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
細胞生長特性:貼壁
B104 [Rat neuroblastoma] Adherent大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
50.B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
3T6 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞
SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
B104 [Rat neuroblastoma] Adherent大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
NCI-H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
MDA-MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
SP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
HO-1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞
H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
SW-1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞
Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
HCT116/L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
BC-027細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
CPAE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞
TE 32.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
B104 [Rat neuroblastoma] Adherent大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Balb/c 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細胞、OSK-1細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細胞、JOSK-M細胞、TGBC11T細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、HcerEpic細胞、G361-mel細胞
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