"B35 Adherent大鼠神經母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經母細胞瘤；BDIX
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
B35 Adherent大鼠神經母細胞瘤細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
DU145細胞系相關產品：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
B958細胞系相關產品：J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
A704細胞系相關產品：VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HS766T細胞系相關產品：CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞
SCL2細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞
NUGC3細胞系相關產品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
細胞生長特性：貼壁
B35 Adherent大鼠神經母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
MonoMac 6細胞系相關產品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
FF-WT-BJ細胞系相關產品：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞
COR-L23/P細胞系相關產品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
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PC3M-IE8細胞系相關產品：NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞
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H-1573細胞系相關產品：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
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WI-38細胞系相關產品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
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P3HRI細胞系相關產品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
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Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關產品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
Hs940.T細胞系相關產品：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
H510細胞系相關產品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
C17細胞系相關產品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
HPAFII細胞系相關產品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
TW01細胞系相關產品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
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HTR8svn細胞系相關產品：HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
Ej138細胞系相關產品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
H-2330細胞系相關產品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關產品：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
MEF (CF-1)細胞系相關產品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
Namalva細胞系相關產品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
H-157細胞系相關產品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
HR1K細胞系相關產品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
K7M2-WT細胞系相關產品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
INS1-E細胞系相關產品：PLA801-95D細胞、WEHI 3B細胞、COLO 699細胞
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130-T細胞系相關產品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
IEC 6細胞系相關產品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
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Kit 225細胞系相關產品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
Hs739T細胞系相關產品：OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關產品：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
HCC941122細胞系相關產品：NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞
SNU668細胞系相關產品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關產品：MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞
OVCAR433細胞系相關產品：BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
FaDu細胞系相關產品：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
HCC-9204細胞系相關產品：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞
TW 01細胞系相關產品：A20細胞、CORL51細胞、CHG-5細胞
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COR-L23/P細胞系相關產品：RKO-E6細胞、HR-8348細胞、NCI-H660細胞
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