"FRO Adherent人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:未分化甲狀腺癌;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
FRO Adherent人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞
RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞
CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MSTO-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
BEL7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
FRO Adherent人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞
JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞
HLEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:50.B1細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞、KE-39細(xì)胞
Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞、TM-4細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞
T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞
SKNSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 432細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞、AR41P細(xì)胞
FRO Adherent人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系
NCIH2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH-2細(xì)胞、RH-30細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞
CHO-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞
P3HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-OV-3細(xì)胞、REC 1細(xì)胞、KMS11細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
SW-839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細(xì)胞、H-87細(xì)胞、Hi5細(xì)胞
NCI H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2/0 Ag-14細(xì)胞、SNU668細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞
SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
KMBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-28細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞
UMNSAH-DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞
KYSE510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
UPCI-SCC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞
NCI747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
MDA175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL28細(xì)胞、HN6細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞
N1E115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST-2細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv-1細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞、H1793細(xì)胞
KMM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
H9c2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU_145細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞
Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-5細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞、CHG5細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
FRO Adherent人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
Hs-675-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910細(xì)胞、C4 I細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
QGY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞
OVCAR.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-446細(xì)胞、HCM細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞
JM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞
HTR-8/SV-neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細(xì)胞、TO175T細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞
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