"TFK-1 Adherent人膽管癌細胞系
細胞背景資料：膽管癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
TFK-1 Adherent人膽管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
BEP2D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
細胞生長特性：貼壁
TFK-1 Adherent人膽管癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
NCIH2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞
H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
Z310細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
SKNAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
CORL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
TFK-1 Adherent人膽管癌細胞系
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
COLO394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
MC 3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
NCI-H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
U-266 AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
RMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
PC-3/M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
NCI-H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
TFK-1 Adherent人膽管癌細胞系
32D.cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞
MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞
IAR 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW-039細胞、EBC-1細胞、SKml2細胞
H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、VE細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細胞、COLO678細胞、NCIH740細胞
"