"DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：結(jié)直腸癌；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明：成纖維細(xì)胞：來(lái)自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來(lái)自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來(lái)自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來(lái)自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí)，細(xì)胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因，尚無(wú)定論，出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō)，其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正常現(xiàn)象，常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中，因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去，稱為細(xì)胞的病理死亡，或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡；細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理，如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況，一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡，是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程，無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō)，都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用，在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時(shí)，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。
SUM52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞
NCTC 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞
COR-L26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
QBC939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細(xì)胞系
HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
HCC-2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE-1細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞
H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
SCL II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞
Hs 737.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細(xì)胞、BT細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞
PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細(xì)胞、A-673細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
P30/0HK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC3細(xì)胞、H2107細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
H-2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞
NE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 180細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
FT-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞、GL-261細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
LU65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細(xì)胞、H2405細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞
LICR-HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB468細(xì)胞、38C-13細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞
Caov-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞、SW13細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細(xì)胞系
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞
MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞
H-1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞
RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
MCA-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞
L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
NOMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
"